基础睡眠医学 | 基础睡眠医学 Fundamental Sleep Medicine
基础睡眠医学 | 基础睡眠医学 Fundamental Sleep Medicine
摘要 目的:观察针刺相对穴“内关与外关”干预治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠海马及穴区肥大细胞(MC)脱颗粒及细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、P物质(SP)表达的影响。方法:将80只雄性Wistar大鼠随机选取12只作为空白组,其余大鼠采用腹腔注射PCPA制作失眠模型,并从中选取造模成功的60只大鼠重新分组编号后分为模型组、单穴组(内关组,外关组)、相对穴组(透刺组,对刺组),每组12只。采用结晶紫染色观察大鼠海马组织形态变化;碘化乙酰胆碱法染色观察穴区组织内形成的MC与血管神经网络结构;甲苯胺蓝染色观察中枢海马、外周穴区组织中MC数量及脱颗粒变化;免疫组织化学检测ICAM-1、SP及其受体SPR(NK1R)蛋白表达;RT-PCR、Western blot检测中枢海马、外周穴区组织ICAM-1 mRNA及其蛋白的表达。结果:空白组海马神经元细胞排列规则,细胞呈圆形,细胞核居中,模型组海马神经元细胞呈不规则形,细胞略稀疏,细胞核偏移;相对穴组细胞形态更接近于空白组,较圆,细胞核居中比例较高。与空白组比较,模型组大鼠海马MC计数与MC脱颗粒率均有提高;与模型组比较,相对穴组大鼠海马MC计数与MC脱颗粒率均有减少,穴区组织MC计数与MC脱颗粒率均有提高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与空白组比较,模型组大鼠海马及穴区组织ICAM-1、SP、SPR(NK1R)的蛋白表达明显升高;与模型组比较,相对穴组大鼠海马ICAM-1、SP、SPR(NK1R)的蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);穴区组织ICAM-1、SP、SPR(NK1R)的蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR、Western blot结果显示,与空白组比较,模型组大鼠海马及穴区组织ICAM-1的mRNA和蛋白表达增多;与模型组比较,相对穴组大鼠海马ICAM-1的mRNA和蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);穴区组织ICAM-1的mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺相对穴“内关与外关”可改善失眠大鼠的睡眠,其机制可能是通过海马与穴区组织共同调控促进MC聚集与脱颗粒产生神经递质变化,且在穴区局部通过SP及ICAM-1等物质与神经血管相接触黏附,形成相对稳定的MC血管神经网络结构。