论著与基础研究 | 肝细胞癌上皮细胞特征基因鉴定及其分子机制研究
论著与基础研究 | 肝细胞癌上皮细胞特征基因鉴定及其分子机制研究
[摘要]目的;基于前期单细胞RNA 测序揭示的肝细胞癌高度异质性,从恶性上皮细胞中筛选关键差异表达基因并进行验证,为确认作为潜在生物标志物或治疗靶点提供依据。方法:对前期已构建的肝细胞癌单细胞转录组数据进行分析,聚焦于恶性上皮细胞群,通过生物信息学方法筛选显著差异表达基因。在肝癌细胞株中,利用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术对候选差异基因进行体外表达水平验证。结果:单细胞数据分析鉴定出神经降压素(Neurotensin,NTS)纤维蛋白原β链(fibrinogen beta chain,FGB)、长链酰基辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)、母系表达基因 3(matermaly expressed gene 3,MEG3)、瘦素受体(leptin receptor,LEPR)和 Janus 激酶 3(Janus kinase 3,JAK3)为肝癌恶性上皮细胞中特异性高表达的关键基因。qRT-PCR实验结果与测序数据高度一致,证实这些基因在肝癌细胞株中的异常表达模式,从而锁定数个在转录组和转录后水平均稳定异常的潜在靶点。结论:通过整合单细胞测序分析与体外分子实验验证,构建从生物信息学发现到实验验证的完整研究闭环。所验证的关键差异基因为深人理解肝癌的发病机制及其作为潜在的诊断标志物或治疗靶点提供了有价值的依据。